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9-26
黑色素瘤細(xì)胞株在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞株能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)也將細(xì)胞株數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞株種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)黑色素瘤細(xì)胞株進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型黑色素瘤細(xì)胞株直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞株需經(jīng)消化后才能分瓶。一般使用蛋白水解酶(比如胰蛋白酶)消化貼壁細(xì)胞株成單個(gè)細(xì)胞株,也可加入乙二胺四乙酸(EDTA)提高消化能力,EDTA是一種二價(jià)離子的螯合劑,能抑制黑色素瘤細(xì)胞株膜上的Ca2+和Mg2+。常用的...
7-26
黑色素瘤細(xì)胞株是從一個(gè)經(jīng)過(guò)生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系或原代培養(yǎng)物用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,克隆具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的單細(xì)胞獲得的細(xì)胞群,稱細(xì)胞株。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。描述一個(gè)黑色素瘤細(xì)胞株時(shí),必須說(shuō)明它的特殊性質(zhì)或標(biāo)志。與細(xì)胞系類(lèi)似,如果不能繼續(xù)傳代或傳代代數(shù)有限,可稱為“有限細(xì)胞株(finitecellstrain)”。如果可以連續(xù)傳代,則可稱為“連續(xù)細(xì)胞株(continouscellstrain)”。再由原細(xì)胞株進(jìn)一步分離培養(yǎng)出與原株性狀不同的...
5-29
LWnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞信息由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子,對(duì)于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)有必要用其來(lái)源細(xì)胞株(ATCCCRL-2648)作對(duì)照。L-M(TK-)cells(ATCCCCL-1.3)用Wnt-3A表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株。Wnt-3A基因編碼一個(gè)有變異的信號(hào)功效分泌性糖蛋白。Wnt基因控制胚胎發(fā)過(guò)程中的許多模式形成和生長(zhǎng)事件。這些細(xì)胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。它們是目前生產(chǎn)Wnt-3A條件培養(yǎng)...
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